محیط کشت bbm - ایران آلجی

محیط کشت bbm یا همان محیط کشت پایه بولد Bold’s Basal Medium (BBM) معمولا برای کشت جلبک های سبز آب شیرین استفاده می شود .

از جمله جلبک‌هایی که در این محیط کشت پرورش می‌یابند، می‌توان به کلرلا (Chlorella)، کلامیدوموناس (Chlamydomonas) و سینِدِسموس (Scenedesmus) اشاره کرد.

این محیط کشت نخستین بار توسط دکتر بولد، با الهام از محیط کشت بریستول (۱۹۱۹)، فرموله شد.

در سال ۱۹۴۹، بولد با تغییر مقدار و نسبت N/P (نیتروژن به فسفر) و افزودن دی‌پتاسیم هیدروژن فسفات، این فرمولاسیون را اصلاح (بهینه‌سازی) کرد‌؛اما آهن و میکروالمنت‌های (ریزمغذی‌های) آن را از فرمول محیط‌های کشت دیگر وام گرفت.

درنهایت، در سال ۱۹۶۳ نسخه نهایی این محیط کشت به‌همراه محلول‌های آهن، EDTA، بوریک اسید و سایر ریزمغذی‌ها به‌طور کامل منتشر شد که جزئیات آن در ادامه آمده است.

دستورالعمل تهیه محیط کشت بی‌بی‌ام (BBM)۱۹۶۳

این تصویر شامل مواد تشکیل دهنده محیط کشت پایه بولد است

برای ساخت این محیط کشت، ابتدا باید ۶ محلول استوک ۴۰۰ میلی‌لیتری طبق جدول زیر تهیه شود:

شماره محلول	فرمول شیمیایی	نام فارسی ترکیب	مقدار نمک (برای تهیه ۴۰۰ میلی‌لیتر استوک)
محلول 1	NaNO₃	سدیم نیترات	۱۰٫۰ گرم
محلول 2	K₂HPO₄	دی‌پتاسیم هیدروژن فسفات	۳٫۰ گرم
محلول 3	CaCl₂⋅2H₂O	کلسیم کلرید دوآبه	۱٫۰ گرم
محلول 4	KH₂PO₄	مونوپتاسیم دی‌هیدروژن فسفات	۷٫۰ گرم
محلول 5	MgSO₄⋅7H₂O	منیزیم سولفات هفت‌آبه	۳٫۰ گرم
محلول 6	NaCl	سدیم کلرید	۱٫۰ گرم

ترکیب و آماده‌سازی محیط کشت BBM

برای تهیه محیط کشت نهایی، به ۹۴۰ میلی‌لیتر آب مقطر، ۱۰ میلی‌لیتر از هر یک از ۶ محلول استوک پایه (که در بالا به آن‌ها اشاره شد) و ۱ میلی‌لیتر از هر یک از ۴ محلول استوک عناصر کم‌نیاز (ریزمغذی‌ها) را که طبق دستورالعمل زیر آماده می‌شوند، اضافه کنید:

محلول استوک (EDTA-KOH): ۵۰ گرم EDTA و ۳۱ گرم KOH را در ۱ لیتر آب مقطر حل کنید.
محلول استوک (آهن): ۴٫۹۸ گرم سولفات آهن هفت‌آبه (FeSO₄⋅7H₂O) را در ۱ لیتر آب اسیدی‌شده حل کنید.
- طرز تهیه آب اسیدی‌شده: ۱ میلی‌لیتر اسید سولفوریک غلیظ را به ۹۹۹ میلی‌لیتر آب مقطر اضافه کنید.
محلول استوک (بوریک اسید): ۱۱٫۴۲ گرم بوریک اسید (H₃BO₃) را در ۱ لیتر آب دیونیزه حل کنید.
محلول استوک (مخلوط ترکیبی ریزمغذی‌ها): ترکیبات زیر را با مقادیر مشخص‌شده، به‌طور کامل در ۱ لیتر آب دیونیزه حل کنید (توجه داشته باشید که برای جلوگیری از ترسیب، هر ماده باید ابتدا به‌طور کامل حل شود و سپس ماده بعدی اضافه گردد):
- سولفات روی هفت‌آبه (ZnSO₄⋅7H₂O): ۸٫۸۲ گرم
- کلرید منگنز چهارآبه (MnCl₂⋅4H₂O): ۱٫۴۴ گرم
- تری‌اکسید مولیبدن (MoO₃): ۰٫۷۱ گرم
- سولفات مس پنج‌آبه (CuSO₄⋅5H₂O): ۱٫۵۷ گرم
- نیترات کبالت شش‌آبه (Co(NO₃)₂⋅6H₂O): ۰٫۴۹ گرم

ویژگی‌های فیزیکوشیمیایی محیط کشت

این فرمولاسیون، محیط کشت پایه بولد (BBM) اصلی را مطابق با استاندارد بیشاف و بولد (۱۹۶۳) به‌دست می‌دهد. پس از آماده‌سازی، میزان pH محیط کشت در محدوده ۶٫۴ تا ۶٫۸ و هدایت الکتریکی (رسانندگی یا EC) آن در حدود 1.4 (میلی‌زیمنس بر سانتی‌متر) خواهد بود.

💡 پیشنهاد کاربردی: برای محاسبه دقیق مقادیر مورد نیاز در حجم‌های مختلف آزمایشگاهی یا صنعتی، می‌توانید از [ماشین‌حساب آنلاین محیط کشت جلبک ایران آلجی] استفاده کنید.